【目的】糖尿病は慢性的な高血糖を主徴とする代謝性疾患であり、その患者は近年増加傾向にある。インスリンは血糖を降下させるホルモンで、膵β細胞から分泌される。また、その分泌障害は糖尿病の主要な病因である。当研究室では、低分子量Gタンパク質であるRab27aに着目し、これまで不活性型だと考えられてきたGDP型のRab27aにのみ結合するタンパク質を複数同定し、その結合がインスリン分泌後の過程、つまりエンドサイトーシスを制御することを報告した。さらに、グルコース刺激により、Rab27aがGTP型からGDP型に変換されることを明らかにしたが、その分子機構は未だ不明である。最近、当研究室はRab27aをGDP型に変換する酵素であるEPI64に結合するタンパク質を探索し、Insulin receptor related receptor (IRR) を同定した。そこで本研究では、膵β細胞におけるIRRの機能解析を目的とした。
【方法】まず、IRRの各種変異体を分子生物学的手法により作製した。作製したプラスミドはIRRの全長に加えて、チロシンリン酸化活性を有する細胞内ドメインである。これらのプラスミドをリポフェクション法により細胞内へ遺伝子導入し、抗タグ抗体を用いた共免疫沈降法の後、SDS-PAGEおよびイムノブロッティングにより相互作用を検討した。また、グルコース刺激の有無によるIRRの細胞内局在は、免疫染色法により検討した。
【結果および考察】IRRは、膵β細胞に特異的な機構を介して、Rab27a関連タンパク質と相互作用することが示唆された。IRRは、膵β細胞においてグルコース刺激によるEPI64の活性化に関与し、それに続くエンドサイトーシスを制御することが示唆された。